Stabilitetstest af tylosinfosfat i “tyleco” kontra tylo­sinfosfat i “tylan”

Stabilitetstest af tylosinfosfat i “tyleco” kontra tylosinfosfat i “tylan”

Stabilitetstest af tylosinfosfat i “tyleco” kontra tylosinfosfat i “tylan”

SAMMENDRAG

Stabiliteten af tylosinfosfat fra firmaerne ECO Animal Health (TYLECO) og Elanco Animal Health (Tylan) er afprøvet for forblandinger og for expanderet og pelleteret færdigfoder ved lagring i 2 og 5 måneder ved stuetemperatur.

Indholdet af tylosin i forblandinger med ca. 10.000 ppm havde ikke ændret sig efter 2 måneders lagring. Forblandingerne blev ikke undersøgt efter 5 måneder.

Der blev målt stort set samme indhold af tylosin i mel og piller umiddelbart efter produktionen for begge produkter. Det ser således ikke ud til, at tylosin ødelægges under expandering og pelletering.

I expanderet og pelleteret færdigfoder var der for begge produkter et betydeligt fald i tylosin-indhold under lagringen.

Efter 2 måneder var indholdet af tylosin i gennemsnit reduceret til 63 procent af indholdet ved start. Efter 5 måneder kunne man kun finde 45 procent af indholdet ved start. Der var ikke statistisk sikker forskel mellem de 2 produkter.

Den manglende stabilitet gør det meget vanskeligt at overholde garantierne for indhold af tylosin i pelleteret færdigfoder, ligesom analysetidspunktet har afgørende betydning for det fundne indhold.

Da der kun er fundet ubetydelig forskel mellem de to produkters holdbarhed, kan man vælge ud fra pris. Man skal dog være opmærksom på, at produkterne har forskellige fysiske egenskaber.

BAGGRUND

Tidligere undersøgelser har vist, at forskellige fabrikater af tylosinfosfat kan have forskellig holdbarhed. Det er endvidere konstateret, at Plantedirektoratet har svært ved at genfinde de deklarerede tylosinmængder i færdigfoder. Der er derfor gennemført en test af to tylosinprodukters stabilitet efter expandering, pelletering og lagring i 5 måneder ved stuetemperatur.

Testen er gennemført i samarbejde med KFK og med den danske forhandler af “TYLECO.” Produktet TYLECO fra ECO Animal Health forhandles i Danmark af firmaet Scanimal Health.

MATERIALE OG METODE

TYLECO (FG 250) leveres som støvfrit pulver, mens Tylan leveres som et “granulat” med ensartet kornstørrelse. Dette betyder, at Tylan i ren form er mere letflydende end TYLECO i ren form. Produkternes fysiske egenskaber er dog ikke undersøgt nærmere i denne afprøvning. Ud fra de to handelsprodukter fremstillede KFK forblandinger indeholdende 10.000 ppm tylosin. Bærestoffet var afskallet sojaskrå.

De to forblandinger blev blandet i en almindelig smågriseblanding (Kvikstart Ideal) på KFKs fabrik i Randers. Der blev anvendt samme procesbetingelser ved fremstilling af de to blandinger. Før pelleteringen passerede blandingerne gennem en expander med en procestemperatur på ca. 105°C.

Der blev fremstillet så store partier, at der var sikkerhed for, at rester fra forrige blanding var ude af anlægget ved prøveudtagningen.

Under fremstillingen af de to blandinger blev der udtaget samleprøver af forblanding, af melfoder før expander og af pelleteret foder efter køletårn. Der blev udtaget 4 prøver hvert sted. Hver samleprøve blev neddelt i 4 enkeltprøver. En oversigt over prøveudtagningen er vist i tabel 1.

En enkeltprøve fra hver samleprøve blev sendt til Bioteknologisk Institut til analyse for tylosin. Tilsvarende fik ECO en enkeltprøve fra hver samleprøve til analyse på et engelsk laboratorium. De overskydende 2 prøver blev opbevaret af Landsudvalget for Svin.

Tabel 1. Oversigt over prøveudtagning

	TYLECO	Tylan
Forblanding; antal samleprøver*	4	4
Melfoder, antal samleprøver*	4	4
Piller, antal samleprøver*	4	4

* Hver samleprøve blev neddelt i 4 enkeltprøver.

Alle prøver blev analyseret ca. 5 dage efter fremstilling på Bioteknologisk Institut med den autoriserede mikrobiologiske analyse, (EF(72/199/EØF)). Endvidere blev forblandingerne analyseret på HPLC for at bestemme indholdet af de forskellige faktorer i tylosin. Prøverne af såvel forblanding som af det pelleterede foder blev genanalyseret efter ca. 65 dages lagring ved stuetemperatur.

ECO Animal Health valgte endvidere at analysere hovedparten af deres kopisæt af prøverne på et engelsk laboratorium. Prøverne blev dog først indleveret til analyselaboratoriet ca. 3 uger efter produktionsdatoen.

Senere blev det besluttet også at analysere nogle prøver efter 5 måneders lagring ved stuetemperatur. Disse prøver blev udtaget af prøverne, opbevaret af Landsudvalget for Svin, og blev i kodet tilstand sent til både Bioteknologisk Institut og det engelske laboratorium.

RESULTATER OG DISKUSSION

Forblandinger

Resultaterne fra analyserne af forblandingerne er vist i tabel 2. Analyserne af forblandingerne viser, at forblandingerne indeholdt det planlagte niveau, og at der ikke skete nævneværdige ændringer med indholdet målt ved mikrobiologisk test efter 2 måneders lagring ved stuetemperatur.

Analyserne på det engelske laboratorium viste et højere niveau af faktor A end analyserne på Bioteknologisk Institut. Begge produkter levede op til minimumskravet til et indhold på faktor A på 80 procent. Det engelske laboratorium har ikke angivet indholdet af de øvrige faktorer.

Analyserne på Bioteknologisk Institut viste, at TYLECO indeholdt mest af biprodukterne faktor B, faktor C, DMT og OXIME, mens Tylan indeholdt mest af faktor D. Analyserne viser, at der er små, men systematiske forskelle mellem produkterne på starttidspunktet. Disse forskelle må dog forventes at være uden praktisk betydning for deres biologiske effekt på starttidspunktet.

Tabel 2. Analyser på forblandinger

Laboratorium	Bioteknologisk Institut							Engelsk laboratorium
Produkt	TYLECO			Tylan			TYLECO		Tylan
Tidspunkt, dage	5	65	5		65	25			25
Antal prøver	4	4	4		4	4			2
Tylosin*, ppm	9.883	9.818	10.055		9.873	11.125			10.500
Antal prøver til HPLC	3		3			4			2
Faktor A, HPLC procent	80,1		84,0			91,8			91,2
Biprodukter
Faktor B, HPLC procent	7		6
Faktor C, HPLC procent	1,4		0,0
Faktor D, HPLC procent	2,6		3,7
DMT, HPLC procent	2,4		1,2
OXIME procent	1,3		0,2

*	Totalindholdet er analyseret med den autoriserede mikrobiologiske test på Bioteknologisk Institut, mens det engelske laboratorium har målt totalindholdet med HPLC.

Pelleteringsstabilitet

Der blev udtaget prøver af den færdigblandede vare før og efter pelletering for at måle stabiliteten. Resultaterne er vist i tabel 3.

Tabel 3. Pelleteringsstabilitet af tylosin fra TYLECO henholdsvis Tylan

Tal i parentes er gennemsnit af 2 analyser. Øvrige tal i tabellen er gennemsnit af 4 analyser.

Der blev målt stort set samme niveau af tylosin i mel og piller, men niveauerne var lidt lavere på det engelske laboratorium, der startede analyserne ca. 3 uger senere. Der var ikke forskel på produkternes evne til at tåle varmebehandlingen.

Ved analyserne fra Bioteknologisk Institut blev det konstateret, at den præcise analysedato påvirkede det fundne niveau, idet der fandtes lavere indhold ved reanalyse end ved 1. analyse. Der er derfor kun medtaget de analyser - og reanalyser - hvor analyseresultatet forelå fra 6-10 dage efter produktionsdagen. Det i tabellerne angivne analysetidspunkt er middelværdien mellem dag for analyser påbegyndt og det tidspunkt, hvor den sidste medtagne analyse var færdig.

I prøverne sendt til Bioteknologisk Institut blev der fundet højere indhold af tylosin i piller end i mel for Tylan. Dette må betragtes som en tilfældighed. Det skal bemærkes, at det var nemmere at udtage repræsentative prøver af de færdige piller end af melvaren.

Lagringsstabilitet

Nedenfor er vist det gennemsnitlige indhold af tylosin på de forskellige måletidspunkter. Der er kun undersøgt lagringsstabilitet for den pelleterede vare.

Tabel 4. Gennemsnitligt tylosinindhold i piller under lagring ved stuetemperatur

Tidspunkt	5 dage	25 dage	65 dage			dage
Laboratorie	Bio.	Eng.	Bio.	Eng.	Bio.		Eng.
TYLECO, ppm tylosin	45	33	25	29	20*		17*
Tylan, ppm tylosin	48	37*	34	29	23*		23*
Pct. af 5 dage, TYLECO	100	73	60			41
Pct. af 5 dage, Tylan	100	77	66			48

* Gennemsnit af kun 2 prøver. Øvrige tal i tabellen er gennemsnit af 4 prøver.

Det fremgår af tabel 4, at der sker et betydeligt fald i tylosinindholdet under lagringen for begge tylosinprodukter. Efter 5 måneder er indholdet af tylosin mere end halveret i forhold til indholdet ved starttidspunktet.

Der blev målt lidt lavere indhold af tylosin fra ECO ved 2 og 5 måneders lagring, men forskellene var ikke statistisk sikre.

Ved de 2 forsøgsproduktioner er der for begge produkter opnået en anelse højere indhold af tylosin end de tilstræbte 40 ppm. Det er usikkert, om dette skyldes en lille overdosering af forblanding eller en usikkerhed ved den mikrobiologiske test.

Konklusion

Det ser ikke ud til, at der forsvinder tylosin under selve pelleteringen, men det kan ikke udelukkes, at processen har betydning for den efterfølgende stabilitet. I praksis har der især været problemer med at genfinde tylosin, efter at expanderne er indført på mange foderfabrikker.

Begge produkter har været stabile i de anvendte forblandinger i op til 2 måneder - målt med mikrobiologisk test. Forblandingerne bestod af tylosin opblandet i afskallet sojaskrå. Det bemærkes, at dette ikke siger noget om stabiliteten i mineralske foderblandinger. Det er således fortsat uklart, om der er risiko for fald i tylosinaktivitet ved lagring af mineralske foderblandinger. En tysk undersøgelse tyder dog på, at tylosin er mere stabil i mineralske foderblandinger end i færdigfoder.

Tylosin fra begge produkter er ustabilt ved lagring i expanderet og pelleteret færdigfoder, og det har ikke været muligt at finde sikre forskelle i holdbarhed for tylosin fra Tylan i forhold til tylosin fra TYLECO.

Den manglende stabilitet ved lagring for de to tylosinprodukter har formentlig kun moderat betydning for deres effekt ved fodring, da hovedparten af foderet bruges inden en måned efter produktionen. Til gengæld giver ustabiliteten betydelige problemer med analytisk at genfinde det garanterede tylosinindhold, med mindre analyserne gennemføres umiddelbart efter produktionen.

Analyselaboratorie

Bioteknologisk

Engelsk laboratorie

Analysetidspunkt, dage

Piller

Piller

TYLECO, ppm tylosin

Tylan, ppm tylosin