Alle NucleoCounter® SP-100 instrumenter, som anvendes på DanAvls KS-stationer, afviger mindre end 2,2 pct. fra producentens referenceinstrument.

I forbindelse med produktionen af NucleoCounter^® SP-100 instrumenterne har producenten udført en sammenlignende undersøgelse af hvert instrument. Hvert instrument er sammenlignet til producentens referenceinstrument.

Afvigelsen i målinger med de enkelte instrumenter i forhold til producentens referenceinstrumentet varierer fra -1,3 til +0,8 pct. Konfidensgrænserne for afvigelserne var -2,2 til +1,8 pct. De observerede forskelle har ingen betydning for indholdet i sæddoserne fra DanAvls KS-stationer.

Baggrund

Alle DanAvls KS-stationer har implementeret NucleoCounter^® SP-100 (SP-100) til koncentrationsbestemmelse af råsæd. SP-100 erstatter det tidligere anvendte fotometer Corning 254. SP-100 er et system, som bygger på en metode, der ligner et tællekammer - antallet af sædceller tælles i et meget specifikt areal og dybden af kammeret er kendt.

For SP-100 foregår selve tællingen af sædceller ved hjælp af digital billedbehandling af et fotografi af sædprøven i kammeret. Arealet, hvor sædcellerne tælles, er fastlåst, idet arealet bygger på den fysiske størrelse af det digitale kamera (den lysfølsomme chip) og forstørrelsen. Dette areal er fysisk udmålt for hver af alle instrumenterne. Selve tællekammeret, hvori sædcellerne tælles, er en engangs-kassette i plastic, som både suger prøven op, blander og fungerer som tællekammer. Dybden af kammeret er cirka 100 µm. For hver eneste kassette er dybden kontrolleret og angivet med en kode, således at instrumentet kan aflæse dybden i intervaller på 2 µm.

Den eneste forskel mellem instrumenterne er således arealet for det digitale billede. Dette skal være korrekt udmålt, for at instrumenterne skal kunne give ens resultater. Dog kan koncentrationsbestemmelsen forstyrres, hvis ikke de digitale kameraer i de forskellige instrumenter giver ens billeder.

Formålet med afprøvningen var at undersøge, hvor ens resultater hvert instrument kunne give ved sammenligning med producentens referenceinstrument.

Materiale og metode

Afprøvningen omfatter en undersøgelse af samtlige 14 instrumenter på DanAvls KS-stationer. Instrumenterne er blevet sammenlignet med et referenceinstrument. Instrumenterne er undersøgt i flere omgange (runder), således at op til tre instrumenter ad gangen blev sammenlignet med referencen.

Ved hver runde blev fem forskellige råsædprøver undersøgt otte gange med hvert instrument. Ved næste runde med de næste tre instrumenter og referencen blev atter fem råsædprøver undersøgt otte gange. Nogle af råsædprøverne indgik i flere af runderne, men opfattes som separate prøver, idet tidsrummet mellem runderne kunne være længere end en time.

Alle koncentrationsbestemmelserne blev udført ens for alle instrumenter. Proceduren er nærmere beskrevet i manualen for instrumentet [1]. Alle koncentrationsbestemmelser blev udført af producenten, som en del af kvalitetskontrollen inden levering af instrumenterne.

Statistisk analyse

Undersøgelse for statistisk sikker forskel mellem instrumenterne blev analyseret med Proc mixed i SAS version 8.02. I modellen indgik den procentvise forskel mellem referencen og det enkelte instrument som afhængig variabel med instrumentets nummer og råsædprøve som forklarende variabel. En vekselvirkning mellem råsædprøve og instrumentets nummer indgik som tilfældig effekt. Gennemsnitligt niveau for hvert instrument blev estimeret tillige med forskellene mellem instrumenterne. Analyserne blev udført separat for hver af de seks runder.

Sikkerheden for de procentvise forskelle mellem instrumenterne er vurderet ud fra et estimat af 95 pct. konfidensintervallet for de procentvise forskelle.

Resultater og diskussion

Resultaterne viste, at kun resultaterne for instrumentet med serienr. 002-02 var statistisk sikkert forskellig fra referencen (p=0,02). Ensartetheden mellem instrumenterne er angivet som procentuelle angivelser i forhold til referencen (tabel 1).

Tabel 1. Sammenligning af SP-100 instrumenter i forhold til referenceinstrument

Runde	Instrument (serienr.)	Afvigelse i pct. til referenceinstrument
1	002-01 002-02 002-03	-1,0 -1,3 -1,0
2	002-04 002-05 002-06	-0,2 0,4 0,8
3	002-07 002-08 002-09	-1,0 0,2 0,8
4	002-10 002-11 002-12	-0,4 0,0 0,5
5	002-13	0,2
6	003-03	0,7

Ud fra analyse af sikkerheden for resultaterne kan det fastslås, at ingen af instrumenterne afviger mere end fra -2,2 til +1,8 pct. fra referencen. Den mulige afvigelse på op til 2,2 pct. anses ikke for at have nogen praktisk betydning i produktionen af sæddoser på KS-stationen.

Konklusion

Afvigelsen i målinger med de enkelte instrumenter i forhold til producentens referenceinstrumentet varierer fra -1,3 til +0,8 pct. Konfidensgrænserne for afvigelserne var -2,2 til +1,8 pct.

Referencer

[1]	Chemometec: (2003): NucleoCounter^® SP-100 Users Guide. Cell Counter for Boars Semen. Manual no. 991-0100, September 10, 2003. Chemometec A/S, Allerød, Danmark.

Deltagere:
Martin Glensbjerg, Chemometec A/S, Gydevangen 43, 4350 Allerød
Statistiker, Mai Britt Friis Nielsen, Landsudvalget for Svin.

Afprøvning: 802

Sammenligning mellem DanAvls KS-stationers NucleoCounter® SP-100 instrumenterne og producentens referenceinstrument