Den nye PRRS kødsafttest er blevet evalueret. Testens karakteristika blev undersøgt i kødsaftprøver udtaget fra slagtesvin på slagteriet fra 70 besætninger med kendt PRRS infektionsstatus.

Den nye PRRS kødsafttest er blevet evalueret. Testens karakteristika blev undersøgt i kødsaftprøver udtaget fra slagtesvin på slagteriet fra 70 besætninger med kendt PRRS infektionsstatus. Testens specificitet blev bestemt til 0,98. Andelen af positive prøver var 0,44 i besætninger smittet med PRRS vaccinelignende virus, 0,64 i besætninger smittet med dansk PRRS virus, og 0,57 i PRRS vaccinerede besætninger smittet med dansk PRRS virus. Der er udviklet regler for PRRS statusfastlæggelse på baggrund af resultaterne af løbende analyse af kødsaftprøverne. Ved at anvende sandsynlighedsregning er det vurderet, at PRRS frie besætninger, som får PRRS betinget status, har en risiko på 55% for at der reelt er tale om PRRS. Risikoen for at få PRRS betinget status for en PRRS fri besætning er 6% per år, og sandsynligheden for at det sker 2 gange på ét år er under 0,5%. Den prædiktive værdi af en PRRS positiv statustildeling er 0,987. Heraf følger, at sandsynligheden for en falsk positiv diagnose i en PRRS fri besætning er 1,3%. Den prædiktive værdi af PRRS fri status er 0,999, og er således meget sikker.

Kødsaftsystemets statustildeling blev valideret i 47 besætninger med PRRS betinget status. Der var fuld overensstemmelse mellem kødsaftsystemets efterfølgende PRRS status tildeling, og status på baggrund af blodprøver fra besætningerne: Atten besætninger var PRRS frie, og 29 besætninger (62%) var PRRS smittede.

Summary

An ELISA test was developed to analyse meat samples from pig carcasses for presence of antibodies against porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV). A study of meat samples from herds with known PRRS status was undertaken. The PRRS status of the herds was evaluated based on analysis of blood samples with another serological test capable of differentiating between infection with PRRSV of American type and European type, respectively. The specificity of the test on meat samples was assessed to be 0.98. The sensitivity of the test depended on the type of PRRSV strain involved. The sensitivity of the test in herds infected with the American type of PRRSV was assessed to be 0.44 by assuming that all pigs from infected herds had truly been infected. The sensitivity of the test in herds infected with the European type of PRRSV was assessed to be 0.64. Herd level sampling and herd level criteria for assessing the PRRS status of herds with the new test were developed. Herds were classified as PRRS negative or PRRS seropositive based on 10 samples collected randomly at slaugther throughout a 3-month-period. Herd PRRS status classification was validated in 47 herds by collection of blood samples from the herds. Eighteen herds were classified as PRRS negative in both test systems. Twenty-nine herds were classified as PRRS seropositive in both test systems. This study confirms that acceptable herd classification can be achieved using a test with less than optimal sensitivity and specificity.

Baggrund

Andet skridt er taget i en ny udvikling inden for sundhedsovervågningen i svinebesætninger. Salmonella-overvågning på kødsaftprøver, udtaget fra slagtekroppen på slagteriet var det første, overvågning for Porcin reproduktions- og respiratorisk sygdom (PRRS) blev det næste. Diagnostik af svinesygdomme på kødsaft er interessant fordi indsamlingen af prøvemateriale på slagteriet kan automatiseres, og derfor er mindre ressourcekrævende end udtagning af blodprøver, og fordi resultaterne foreligger som en løbende overvågning i modsætning til statusfastlæggelse f.eks. én gang om året ved hjælp af blodprøver.

PRRS overvågningen er på flere punkter ganske forskellig fra salmonella-overvågningen. Testen er udviklet til almindelig diagnostik i svinebesætninger, og ikke som led i et offentligt kontrol-program. Det enkelte prøveresultat er afgørende, idet besætninger løbende skal deklareres fri eller smittet, i modsætning til ved salmonella-overvågningen, hvor det enkelte prøveresultat ikke er afgørende, men indgår i en samlet beregning af besætningens salmonella-niveau. Det sidste punkt medfører, at den praktiserende dyrlæge bør inddrages, når resultaterne af PRRS-overvågningen skal vurderes.

PRRSV kan på basis af antigene forskelle inddeles i 2 typer: en amerikansk og en europæisk (Nelson et al., 1993; Murtaugh et al., 1995). Forskellene har gjort det muligt at skelne mellem besætninger smittet med den europæiske og den amerikanske type på baggrund af serologiske undersøgelser af blodprøver fra besætningerne (Sørensen et al., 1998; Wensvoort et al., 1992). I Danmark forekommer både den amerikanske og den europæiske type af PRRSV. Tilstedeværelsen af PRRSV af den amerikanske type skyldes anvendelse af en levende vaccine baseret på et amerikanske isolat (VR 2332). I juli-august 1996 påviste Statens Veterinære Institut for Virusforskning (SVIV) spredning af PRRS vaccinen via sæd fra KS orner til PRRS frie, ikke-vaccinerende besætninger, bl.a. på baggrund af prøver, som var udtaget før vaccinen fik markedsføringstilladelse (Bøtner et al., 1997; Madsen et al., 1998). Siden da har SVIV påvist PRRSV vaccinelignende isolater (PRRS-Vac) i mange besætninger, som ikke havde vaccineret, og som iøvrigt var fri for dansk PRRSV (PRRS-DK). Mange af disse besætninger har oplevet klinisk udbrud af PRRS (Bøtner et al., 1997), og PRRS-Vac spredes nu i svinepopulationen som en selvstændig infektion. Situationen vedrørende PRRSV i Danmark er gennemgået i DVT for nylig (Bøtner og Toft, 1999).

Der er ikke foretaget egentlige stikprøve-undersøgelser af forekomsten af PRRS siden 1996 (Mortensen and Strandbygaard, 1996), men på baggrund af de diagnostiske undersøgelser til dato, i besætninger som deltager i DANSKE SLAGTERIER's PRRS register, kan det konstateres, at 43% af sobesætningerne og 47% af slagtesvinebesætningerne i november 1998 var smittet med PRRS mod henholdsvis 33% og 37% i samme måned året før (figur 1). Der er endnu ikke lavet opgørelser af forekomsten af de to typer af PRRS hver for sig. Besætningerne, som indgik i undersøgelsen, repræsenterede 875.000 søer (ca. 80% af alle søer i DK) og 2,8 mill. slagtesvin (ca. 55% af alle slagtesvin i DK) i november 1998. Antallet af besætninger i overvågningen har ligget nogenlunde konstant på dette niveau siden starten af 1997.

Den vigtigste præventive foranstaltning imod PRRS er stadig indkøb af svin fra besætninger som er PRRS fri. Der er derfor fortsat behov for PRRS overvågning i PRRS frie besætninger som sælger smågrise. PRRS fri slagtesvinebesætninger kan have nytte af løbende PRRS-overvågning i forbindelse med diagnostisk afklaring af pludseligt opståede sygdomsproblemer. Med henblik på at foretage en løbende overvågning, er der udviklet en ELISA test til anvendelse på kødsaft. Testen er en indirekte ELISA, som ikke skelner mellem PRRS infektion af europæisk og amerikansk type. Testens specificitet og sensitivetet er bestemt på et panel af parrede blod-/kødsaftprøver, idet testresultatet opnået i blokerende ELISA på blodprøven er sat som “golden standard” (Bertel Strandbygaard, data ikke publicerede). På prøver fra PRRS frie besætninger blev testens specificitet bestemt til 95,4%. Testens sensitivitet i grise fra besætninger smittet med henholdvis PRRS-Vac, PRRS-DK og PRRS af begge typer blev bestemt til 90,1, 94,2 og 97,2. Testen er udviklet i samarbejde mellem Statens Veterinære Institut for Virusforskning, Statens Veterinære Serumlaboratorium og DANSKE SLAGTERIER.

Figur 1. Forekomst af PRRS i Danmark. Andelen af PRRS positive besætninger i DANSKE SLAGTERIER’s PRRS register januar 1997 til november 1998

PRRS statustildeling med kødsaftsystemet

Der analyseres løbende ca. 40 prøver per besætning per år. På baggrund af besætningens leverance af slagtesvin de seneste 13 uger, beregnes at hver n’te svin som sendes til slagtning skal undersøges, således at der i alt opnås 40 prøver per år. Prøvematerialet tages af den kødsaft, som alligevel skal undersøges for salmonella. I gennemsnit bliver der således analyseret 3,3 prøver per måned per besætning, eller 10 prøver per 3 måneder per besætning.

Besætninger kan starte PRRS overvågning som PRRS frie, ukendte eller PRRS positive. Nedenfor følger reglerne for PRRS status-fastlæggelse.

PRRS fri besætninger får PRRS betinget status, så snart der optræder 2 positive prøver blandt de seneste 10 prøver. Hvis der højst er én, beholder besætningen PRRS fri status.
Besætninger som får betinget status, får udtaget 10 prøver blandt de følgende 1-3 ugers leverance af slagtesvin, eller så snart der er leveret 12-15 svin til slagtning. Hvis der blandt disse prøver højst er én positiv prøve, får besætningen PRRS fri status. Hvis der er 2 (eller flere) positive prøver, får besætningen PRRS positiv status.
Besætninger med ukendt status får PRRS fri status, hvis der blandt de 10 første prøver er 0 eller én positiv prøve, PRRS betinget status hvis der er 2, 3 eller 4 positive prøver, eller PRRS positiv status hvis der er 5 til 10 positive prøver.
PRRS positive besætninger kan ikke ændre PRRS status i kødsaftsystemet på trods af udelukkende negative prøver. Dertil kræves en sanerings-erklæring, underskrevet af besætningens dyrlæge.

Som udgangspunkt for regler for PRRS statusfastlæggelse har vi gennemført en undersøgelse for at vurdere andelen af positive prøver i henholdsvis PRRS frie og PRRS smittede besætninger med kødsafttesten (undersøgelse 1). I sammenhæng hermed har vi til støtte for tolkningen beregnet pålideligheden af besætningsdiagnostik vha. af kødsafttesten (undersøgelse 2), og derefter set på validiteten af diagnostikken i praksis (undersøgelse 3).

Materiale og metoder

Undersøgelse 1. Tilsyneladende PRRS prævalens baseret på kødsafttest i udvalgte besætninger

Andelen af positive prøver i PRRS kødsafttesten blev undersøgt i 71 besætninger. På baggrund af blodprøver fra 1997, som var testet i dobbelt blokerende ELISA (Sørensen et al., 1998), blev besætningerne udvalgt således, at der var 4 kategorier af infektionsstatus repræsenteret i undersøgelsen: PRRS frie besætninger, besætninger smittet med PRRS-DK, besætninger smittet med PRRS-Vac, og besætninger smittet med begge typer af PRRS, dvs. PRRS-DK smittede besætninger, som havde vaccineret i 1996. Alle kødsaftprøver fra besætningerne, udtaget som følge af salmonella-overvågningen, blev undersøgt for antistoffer i PRRS kødsafttesten i perioden 3. december 1997 - 27. februar 1998.

Undersøgelse 2. Sandsynlighedsvurdering af PRRS kødsaftsystemets statustildeling

På baggrund af andelen af positive prøver i henholdsvis sygdomsfri besætninger og smittede besætninger kan man beregne sandsynligheden for korrekt klassifikation af sygdomsfri og PRRS smittede besætninger. Man behøver end ikke kende testens specificitet og sensitivitet, eller den sande prævalens i smittede besætninger. Ved hjælp af formler hos Martin et al. (1992) har vi beregnet sandsynligheder for tildeling af PRRS betinget status i henholdsvis sandt PRRS smittede og sandt PRRS frie besætninger på baggrund af 3 måneders overvågning. Besætninger får analyseret 10 prøver på 3 måneder. Vi har anvendt værdierne for andelen af positive prøver i henholdsvis PRRS frie besætninger og PRRS smittede besætninger fra undersøgelse 1. Sandsynligheder for tildeling af PRRS positiv status og PRRS fri status i henholdsvis sandt PRRS smittede og sandt PRRS frie besætninger er ligeledes beregnet.

På nuværende tidpunkt er der 2000 PRRS frie besætninger i overvågningen. Ved konservativt at forudsætte, at incidensen af PRRS smitte er 8% per år (Mortensen og Strandbygaard, 1996; figur 1) må man forvente, at 2% (40 besætninger) bliver smittet per 3 måneder, mens de resterende 1960 besætninger stadig er PRRS frie. Ved indsættelse af en forventet forekomst af PRRS smittede besætninger på 2%, kan der beregnes prædiktive værdier af kødsaftsystemets PRRS betinget status, PRRS positiv status og PRRS fri status. Den prædiktive værdi er sandsynligheden for at status-tildelingen for en given besætning er korrekt.

Undersøgelse 3.Validering af PRRS kødsaftsystemets statustildeling

For at validere PRRS statustildelingen til besætninger på baggrund af kødsafttesten, gennemførte vi en opfølgende undersøgelse. Besætninger blev tilbudt at deltage hvis de fra systemets start i januar 1998 til 11. maj 1998 fik tildelt PRRS betinget status af systemet. Besætningerne skulle acceptere at få analyseret minimum 20 blodprøver fra besætningen, og samtidigt fortsætte kødsaftovervågningen, indtil de fik tildelt PRRS fri, eller PRRS positiv status af kødsaftsystemet. Som udgangspunkt skulle besætningerne være PRRS frie ved start af kødsaftovervågning på baggrund af blodprøver udtaget efter 1. juli 1997 (ca. 900 besætninger), således at vi måtte forvente at andelen af smittede besætninger var meget lille, og at kødsaftsystemets klassifikation af PRRS status kunne evalueres i den periode hvor besætningen blev smittet. Undersøgelsens mål var at validere kødsaftsystemets klassifikation af besætninger, at sammenligne de prædiktive værdier med de forventede værdier (fra undersøgelse 2), og at sammenligne testens specificitet, og andelen af positive prøver i smittede besætninger med resultatet af undersøgelse 1.

Resultater

Undersøgelse 1. Tilsyneladende PRRS prævalens baseret på kødsafttest i udvalgte besætninger

Af de 71 besætninger i undersøgelsen, måtte én besætning udelades af opgørelsen, da det viste sig, at prøverne reelt stammede fra 2 besætninger med henholdsvis PRRS fri og PRRS positiv status. Der fandtes 2,0% (falsk) positive prøver fra PRRS frie besætninger (tabel 1). Det svarer til at testens specificitet er 0,98. Fra de smittede besætninger fandtes der 64%, 44% og 57% positive prøver i henholdsvis PRRS-DK smittede, PRRS-Vac smittede, og besætninger smittet med begge typer af PRRS.

Tabel 1. PRRS kødsaft test-resultater i besætninger med kendt PRRS status

PRRS status	Antal besætninger	Antal kødsaftprøver	% positive prøver
PRRS fri	27	510	2,0
PRRS-DK	11	163	64
PRRS-Vac	15¹	188	44
PRRS-DK+Vac	17	239	57
¹ Én besætning udeladt af opgørelsen, da prøverne stammede fra to stalde med henholdsvis PRRS fri og PRRS positiv status

Undersøgelse 2. Sandsynlighedsvurdering af PRRS kødsaftsystemets statustildeling

Sandsynligheden for tildeling af PRRS betinget status i henholdsvis sandt PRRS smittede og sandt PRRS frie besætninger på baggrund af 10 prøver (3 måneders overvågning) er beregnet i Appendix, tabel A. Sandsynligheder for tildeling af PRRS positiv status og PRRS fri status i henholdsvis sandt PRRS smittede og sandt PRRS frie besætninger på baggrund af 10 prøver plus 10 ekstra prøver i besætninger med PRRS betinget status er beregnet i Appendix, tabel B. Når der er en sandsynlighed på 2% for, at den enkelte prøve er (falsk) positiv, kan sandsynligheden for, at en reelt PRRS fri besætning får PRRS betinget status beregnes til 1,6% (se tabel A i appendix). Man må derfor forvente, at blandt 1960 besætninger, vil det ske for 32 besætninger (tabel C i appendix). I en PRRS smittet besætning (med antagelse af 44% positive prøver), kan sandsynligheden for, at der udløses betinget status beregnes til 97,3% (se tabel A i appendix). Derfor forventes 97,3% af 40 smittede besætninger (= 39 besætninger), at få PRRS betinget status (tabel C i appendix). PRRS frie besætninger kan ikke få PRRS positiv status umiddelbart, men får først PRRS betinget status (så snart der er 2 positive prøver ud af 10), og dernæst PRRS positiv status (mindst 2 positive prøver ud af de næste 10 prøver). Sandsynligheden for falsk positiv PRRS diagnose i en PRRS fri besætning er 0,3 ‰ (tabel B i appendix). Den teoretiske risiko for ikke at opdage PRRS smitte i 3 måneder er 5% (tabel B i appendix).

Den positive prædiktive værdi af PRRS betinget status er 0,55 (tabel C i appendix). Dermed menes, at der er en risiko på 55% for, at det reelt er PRRS når en besætning får PRRS betinget status. Omvendt er der 45% chance for, at det ikke er PRRS. Den prædiktive værdi af kødsaftsystemets PRRS positiv status er væsentlig højere, nemlig 0,974 (Appendix, tabel D).

Den prædiktive værdi af PRRS fri status er 0,999 (Appendix, tabel D).

Undersøgelse 3. Validering af PRRS kødsaftsystemets statustildeling

I alt 89 besætninger fik PRRS betinget status i valideringsfasen. Af de 89 besætninger accepterede i alt 49 besætningsejere tilbuddet om en opfølgende blodprøve-undersøgelse, og fortsatte samtidigt kødsaftovervågning af besætningen. Vi har udeladt to besætninger af opgørelsen, da de indsendte blodprøver ikke stammede fra den gruppe svin, som var undersøgt i kødsaftsystemet. Resultatet af klassifikationen af besætningens PRRS status på baggrund af kødsaft-systemet og blodprøver fremgår af tabel 2.

Tabel 2. Validering af PRRS kødsaftsystemet. PRRS status tildeling til besætninger med betinget status ved hjælp af blodprøver og PRRS kødsaftsystemet

	Status på baggrund af blodprøver
Kødsaftsystemets statustildeling	PRRS fri	PRRS positiv
PRRS fri	18	0
PRRS positiv	0	29
Procent besætninger med PRRS blandt besætninger med betinget status 29/47=62%

Der var fuld overensstemmelse mellem blodprøver og kødsaftprøver på besætningsplan. Niogtyve besætninger ud af 47 (62%) af besætningerne med betinget status var således reelt smittet med PRRS.

Besætninger som blev klassificeret som PRRS positive, blev evalueret som PRRS-DK smittede besætninger og/eller PRRS-Vac smittede på baggrund af de serologiske undersøgelser af blodprøverne. Resultaterne fremgår af tabel 3. Toogtyve blandt de 29 besætninger var smittet med PRRS-DK, og 7 besætninger var smittet med PRRS-Vac. Ingen besætninger var blevet smittet med begge typer PRRS. I besætninger smittet med PRRS-DK var 57% prøver positive i kødsafttesten. I besætninger smittet med PRRS-Vac var 34 % prøver positive.

Antallet af (falsk) positive prøver fra PRRS fri besætninger i valideringsfasen fremgår af tabel 3. I alt var 2,3% af prøverne positive.

Tabel 3. Validering af PRRS kødsaftsystemet. Antal positive prøver i PRRS kødsafttesten fra dato for betinget status (21. januar 1998 - 11. maj 1998) til 1. november 1998

	Antal positive prøver	Antal testede prøver	% positive prøver
22 PRRS-DK smittede besætninger	278	491	57
7 PRRS-Vac smittede besætninger	50	146	34
18 PRRS fri besætninger	10	435	2,3

Diskussion

Testens specificitet

Andelen af falsk positive prøver i undersøgelse 1 og 3 var henholdsvis 2,0 og 2,3%. Der var således god overensstemmelse mellem de to undersøgelser. Det svarer til, at testens specificitet er 0,98. PRRS frie besætninger skal som følge af testens (suboptimale) specificitet derfor forvente, at i gennemsnit hver 50. prøve er positiv, og derfor indeholder reglerne for statusfastlæggelse også, at der per 10 prøver kan optræde én positiv prøve, uden at PRRS fri status ændres. Man skal i den praktiske situation holde sig for øje, at andre fejl end de der skyldes PRRS kødsaft-testen, kan give ‘underlige’ resultater, og dermed tage sig ud som falske positive i testen. Det er et højt automatiseret system, som hviler på, at der er etableret den korrekte sammenhæng i slagteriets database vedrørende besætningens CHR nummer og leverandørnummer. Det er derfor vigtigt, at besætningsejeren tjekker slagtedage, CHR numre og leverandørnumre på sine prøver. Tidligere blev kødsaftprøver fejl-identificeret i situationer, hvor der på slagteriet blev indtastet et forkert leverandørnummer for en slagtekrop. Denne fejl er der imidlertid systemteknisk taget hånd om, således at prøven annuleres, når slagteriet ved dagens afslutning retter fejlen af hensyn til korrekt afregning af slagtekroppen.

Testens sensitivitet

Hvad angår andelen af positive prøver i smittede besætninger, var resultaterne i valideringsfasen i overensstemmelse med den første undersøgelse: Andelen af positive prøver i kødsaftsystemet er størst i PRRS-DK smittede besætninger (ca. 60%). I PRRS-Vac smittede besætninger er andelen af positive prøver omkring 40%. Andelen af positive prøver i smittede besætninger er lig med testens sensitivitet gange andelen af smittede grise. Vi har lavet en opgørelse af testresultater ved undersøgelse af blodprøver i blokerende ELISA i 3 indsendelser fra PRRS positive slagtesvinebesætninger. Her var andelen af positive prøver fra slagtesvinebesætninger ca. 83% og i godt halvdelen af indsendelserne var alle prøver antistof-positive. Andelen af smittede grise i PRRS positive slagtesvinehold er således mindst 83%.

Som tidligere nævnt er sensitiviteten for den indirekte ELISA som anvendes i kødsafttesten bestemt til 94,2 (PRRS-DK) og 90,1 (PRRS-Vac), og hvis testens sensitivitet i daglig drift var den samme, måtte vi forvente, at andelen af positive prøver i kødsafttest i henholdsvis PRRS-DK og PRRS-Vac smittede besætninger (med 83% sandt smittede grise) var 78% og 75%. Vi ved ikke i hvilken grad den forholdsvis lave andel af positive prøver i daglig drift af kødsafttesten (ca. 60% og ca. 40%) skyldes sensitivitet af testen, eller at andelen af smittede slagtesvin i de undersøgte besætninger er lavere end forventet. To af de 7 PRRS-vac smittede besætninger i tabel 3 var sektionerede, og af blodprøve-undersøgelsen fra disse besætninger fremgik, at ikke alle sektioner var smittede. I sektionerede besætninger kan andelen af positive prøver i kødsaftsystemet derfor være lavere.

Betinget status

Man skal forvente, at i ca. 40% af tilfældene med PRRS betinget status, er der tale om “falsk alarm”. Det viste både de teoretiske beregninger i undersøgelse 2, og valideringen i undersøgelse 3. For besætninger i et nær PRRS frit område - som i den nordligste del af Nordjylland efter et område-saneringsprogram - er der i en større del af tilfælde med PRRS betinget status tale om “falsk alarm”.

En 1,6% risiko for, at en reelt PRRS fri besætningen får betinget status per 3 måneder lyder ikke af meget, men i løbet af ét år med PRRS overvågning, er der faktisk tale om en risiko, som er ca. 4 gange større, eller 6% (1). Hvis besætninger af handelsmæssige årsager ønsker at afklare en PRRS betinget status med blodprøver, skal de derfor forvente, at det vil ske hver 16. år. Det sædvanlige alternativ er at lave PRRS overvågning ved hjælp af årlige blodprøver. Risikoen for at få betinget status 2 eller flere gange på et år for en PRRS fri besætning er under ½% (2). Med 2000 PRRS frie besætninger i overvågningen vil det derfor højst ske for 10 besætninger på landsplan hvert år, og man skal forvente, at det vil ske.

Falsk positive prøver kan være meget generende for den enkelte besætningsejer, når der udløses PRRS betinget status. I en periode efter PRRS betinget status vil der være usikkerhed om besætningens smittestatus, og det skal besætningsejeren kunne håndtere mentalt, såvel som i praksis i forhold til sine eventuelle købere. Kødsaft-systemet er netop blevet forbedret, således at perioden med PRRS betinget status forkortes fra 8-12 uger til 4-5 uger, eller -hvis det er en lille besætning- til der i alt er leveret 12-15 svin til slagtning. Prøverne bliver i dette tilfælde taget fra hvert eneste svin der sendes til slagtning, og ikke kun fra svin, der undersøges for salmonella.

Falsk positiv status

Risikoen for at få falsk positiv status på 3 måneder er 0,3‰. Den årlige risiko er ca. 4 gange større, eller 1 ‰ (3). På landsplan vil det dreje sig om 2-4 besætninger per år der får falsk PRRS positiv status, eller ca. 1-3% af de besætninger som bliver erklæret PRRS positive i kødsaftsystemet (tabel D i appendix). For at være på den sikre side er det derfor klogt at verificere kødsaftsystemets PRRS positive klassifikation v.h.a. blodprøver, hvis der ikke har været kliniske problemer i besætningen, eller hvis diagnosen på anden måde er overraskende. Besætningen kunne være én af dem som faktisk er falsk positiv. En falsk positiv diagnose kan gå hen at blive sand, hvis besætningsejeren på baggrund af diagnosen vælger at købe dyr ind fra andre end PRRS frie besætninger.

Falsk PRRS fri status

Tilfælde af falsk PRRS fri status i kødsaft-systemet er i sagens natur vanskelig at opdage, da der typisk ikke vil være grund til at udtage blodprøver i besætningen. Den teoretiske risiko for ikke at opdage PRRS smitte i 3 måneder er 5% (tabel B i appendix). Risikoen for ikke at opdage smitte i 6 måneder er under ½% (4). Selv hvis der er tale om en besætning med 25% positive prøver, er chancen for at opdage smitten i løbet af 3 og 6 måneder henholdsvis 57% (5) og 82% (6).

Som det fremgår af den opfølgende undersøgelse af kvaliteten af PRRS kødsaft-overvågningen, og også af de teoretiske overvejelser, er der etableret et tilfredsstillende system til screening og overvågning af PRRS frie besætninger. Man kan fæste lid til, at besætninger, som fortsat erklæres frie af systemet også er det, eller i det mindste har været det indtil få måneder før. Hvis besætninger i stedet bliver overvåget for PRRS med blodprøver én gang om året, kan der principielt gå op til ét år, før infektionen opdages, og i gennemsnit vil der gå 6 måneder i subkliniske tilfælde, eller hvor eventuelle kliniske problemer ikke er fulgt op med diagnostik for PRRS. Det har betydning for købere fra smågrise-producerende besætninger. Ikke hvis der er tale om en fast leveringsaftale med månedlige leverancer, for da vil begge overvågningsmetoder i reglen komme for sent. Men for købere af PRRS fri grise fra ‘puljen’ (hos SPF-selskabet) vil der være større sikkerhed, hvis leverandører til puljen er kødsaft-overvågede. Og for købere, som skifter til en PRRS fri smågrise-producent, er der større sikkerhed for den PRRS fri status, hvis den nye leverandør er overvåget med PRRS kødsaftsystemet.

Vi har gjort et forsøg på at sammenligne kvaliteten af den nuværende PRRS overvågning i slagtesvine-besætninger på basis af kødsaftprøver, med 20 årlige blodprøver testet i blokerings ELISA (tabel 4). Som det fremgår er der næsten ingen problemer med betinget status og falsk positive besætnings-diagnoser med blodprøver. I kødsaftsystemet kunne problemet med falsk positive prøver reduceres ved f.eks. kun at teste 20 prøver om året. Det vil imidlertid gå ud over overvågningens evne til forholdsvis hurtigt at finde de smittede besætninger; DANSKE SLAGTERIER har derfor valgt at teste 40 prøver om året, således at de direkte omkostninger for landmanden er ens med de to metoder. Også reglerne for statustildeling kan ændres således at der skal flere prøver til at udløse betinget status. Men igen vil det gå ud over systemets evne til hurtigt at påvise smitte. Sammenfattende kan konkluderes, at testning af blodprøver laboratorie-diagnostisk er bedre end kødsaftprøver, men at kødsaftovervågning hurtigere finder de smittede besætninger i kraft af, at det er en løbende overvågning og at der analyseres flere prøver.

Tabel 4. Sammenligning af kvaliteten i ét års PRRS kødsaftovervågning med 20 årlige blodprøver testet i PRRS blokerings-ELISA i kontinuert drevne slagtesvinebesætninger

	Ét års kødsaftovervågning	20 årlige blodprøver
Risiko for betinget status i fri bes.	6%	0,1%¹
Risiko for falsk positiv klassifikation	1,6%	0%²
Risiko for falsk negativ klassifikation	meget lille	meget lille
Pct. smittede bes. fundet på 3 mdr.	95%	25%
Pct. smittede bes. fundet på 6 mdr.	99,5%	50%
Pct. smittede bes. fundet på 12 mdr.	100%	100%
¹ Betinget status ved 1 positiv blodprøve (38 ud af 31.109 besætningsundersøgelser) ² Positiv klassifikation ved 2 eller flere positive blodprøver.

Nytten af PRRS overvågning i PRRS smittede besætninger er knap så indlysende. For kontinuert drevne besætninger vil der almindeligvis ikke være nogen nytte at hente af overvågningen, selvom % positive prøver svinger fra måned til måned. Som regel er der tale om, at tilfældigheder alene forklarer, hvis der f.eks. over 2 måneder optræder 5 negative prøver i træk. Sektionerede besætninger kan dog have gavn af overvågningen til at belyse om der ind imellem er slagtesvine-sektioner, som er PRRS fri.

Trods PRRS kødsafttestens tilsyneladende lave sensitivitet og en rate af falsk positive prøver i PRRS fri besætninger på 2%, er der etableret en fornuftig PRRS overvågning, som forudsætter at man er klar over - og kan leve med - systemets begrænsninger. Udviklingen af systemer til sundhedsovervågning af besætninger på kødsaft-materiale fortsætter. Umiddelbart arbejdes der med at forbedre PRRS testens sensitivitet og specificitet, men det vil også have interesse blandt producenter, hvis det er teknisk muligt at udvikle tests for andre infektioner. Sådanne projekter er undervejs.

(1) = 1 ÷ (1 ÷ 0,016)⁴ = 0,062

(2) = P{Y>2|Ye bin(4;0,016} = 0,0015

(3) = 1÷(1÷0,0003)⁴ = 0,0012

(4) = [1÷0,947]² = 0,0028

(5) = [P{Y>2|Ye bin(10;0,25}]² = 0,571

(6) = 1 ÷ [1 ÷ 0,571]² = 0,815

Referencer

Bøtner, A., Strandbygaard, B., Sørensen, K.J., Have, P., Madsen, K.G., Madsen, E.S. and S. Alexandersen, 1997: Appearance of acute PRRS-like symptoms in sow herds after vaccination with a modified live PRRS vaccine. Veterinary Record, 141: 497-499.

Bøtner, A. og P.S. Toft, 1999: Porcin reproduktions- og respirations sygdom (PRRS) - en oversigtsartikel med fokus på den danske situation og erfaringer med anvendelsen af en levende vaccine. Dansk VeterinærTidsskrift, 82, 5: 175-182.

Madsen, K.G., Hansen, C.M., Madsen, E.S., Strandbygaard, B., Bøtner, A., and K.J. Sørensen, 1998: Detection of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus of American type in Danish swine herds. Arch.Virol, 143, 1683-1700.

Martin, W.S., Shoukri, M., and M.A. Thorburn, 1992: Evaluating the health status of herds based on tests applied to individuals. Prev. Vet. Med., 14: 33-43.

Mortensen, S., and B. Strandbygård, 1996: PRRS spredes nu langsommere.VeterinærINFORMATION nr. 4, 35-36.

Murtaugh, M.P., Elam, M.R, and L.T. Kakach, 1995: Comparison of structural protein coding sequences of the VR-2332 and Lelystad virus strains of the PRRS virus. Arch. Virol., 140, 1451-1460.

Nelson, E.A., Christoffer-Jennings, J. Drew, T., Wensvoort, G., Collins, J.E., and D.A. Benfield, 1993: Differentiation of United States and European strains of porcine reproductive and respiratory syndrome virus by monoclonal antibodies. J. Clin. Microbiol., 31, 3184-3189.

Sørensen, K.J., Strandbygaard, B., Bøtner, A., Madsen, E.S., Nielsen, J., and P. Have, 1998: Blocking ELISA’s for distinction between antibodies against European and American strains of porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus. Vet. Microbiol.,60, 169-177.

Wenvoort, G., De Kluyver, E.P. Luijtze, E.A., Den Besten, A., Harris, L., Collins, J.E., Christianson, W.T., and D. Chladek, 1992: Antigenic comparison of Lelystad virus and swine infertility and respiratory syndrome (SIRS) virus. J. Vet. Diagn. Invest., 4, 134-138.

Appendiks -Sandsynligheder

Forklaring til notation af sandsynligheder:

P{Y>a|Ye bin(b; p} skal læses som sandsynligheden for, at der påvises a eller flere positive prøver blandt b prøver, når hver prøve har en sandsynlighed på p for at være positiv.

Tabel A. Sandsynligheder for PRRS kødsaftsystemets tildeling af PRRS status i 10 prøver.
Binomielle sandsynligheder er beregnet på basis af andelen af positive prøver i henholdsvis sandt PRRS frie (2%) og sandt PRRS smittede besætninger (44%), og reglerne for tildeling af PRRS status.

Kødsaftsystemets klassifikation	sandt PRRS positive besætninger	sandt PRRS frie besætninger
PRRS betinget status	P{Y>2\|Ye bin(10; 0,44} = 0,973	P{Y³2\|Ye bin(10; 0,02} = 0,016
PRRS fri status	1÷P{Y>2\|Ye bin(10; 0,44} = 0,027	1÷P{Y³2\|Ye bin(10; 0,02} = 0,984

Tabel B. Sandsynligheder for PRRS kødsaftsystemets tildeling af PRRS status i 10 prøver, og 10 ekstra prøver i besætninger med PRRS betinget status i tabel A.
Binomielle sandsynligheder er beregnet på basis af andelen af positive prøver i henholdsvis sandt PRRS frie (2%) og sandt PRRS smittede besætninger (44%), og reglerne for tildeling af PRRS status.

Kødsaftsystemets klassifikation	sandt PRRS positive besætninger	sandt PRRS frie besætninger
PRRS positiv status	[P{Y>2\|Ye bin(10; 0,44}]² = 0,947	[P{Y>2\|Ye bin(10; 0,02}]² = 0,0003
PRRS fri status	1÷[P{Y>2\|Ye bin(10; 0,44}]² = 0,053	1÷[P{Y>2\|Ye bin(10; 0,02}]² = 0,9997

Tabel C. Prædiktiv værdi af PRRS betinget status.
Forventning til PRRS kødsaftsystemets tildeling af status med 10 prøver (3 måneders løbende PRRS overvågning) i 2.000 besætninger, heraf 2% PRRS smittede. Den positive prædiktive værdi af betinget status er 39/71= 0,55.

Kødsaftsystemets klassifikation	sandt PRRS positive besætninger	sandt PRRS frie besætninger
PRRS betinget status	39	32	71
PRRS fri status	1	1928	1929
	40	1960	2000

Tabel D. Prædiktive værdier af PRRS positiv/PRRS fri status
Forventning til PRRS kødsaftsystemets tildeling af status med 10 prøver (3 måneders løbende PRRS overvågning) i 2000 besætninger med 2% PRRS smittede besætninger efter 10 ekstra prøver i besætninger, som fik PRRS betinget status. Den prædiktive værdi af PRRS positiv status er 38/39 = 0,974. Den prædiktive værdi af PRRS fri status er 1959/1961 = 0,999

Kødsaftsystemets klassifikation	sandt PRRS positive besætninger	sandt PRRS frie besætninger
PRRS positiv status	38	1	39
PRRS fri status	2	1959	1961
	40	1960	2000

Kilde: Dansk Veterinærtidsskrift nr. 14, 15. juli 1999, 82. årgang side 626-631

PRRS overvågning på kødsaftprøver fra svinebesætninger